随着国家对环境问题的日益重视，越来越多的检测设备和技术应用于水质检测中。其酶底物法检测粪大肠菌群以操作简便、检测时间短、结果可靠而被广泛应用。那么，我们在使用酶底物法检测时应注意哪些问题？下面我们一起看看。
采用酶底物法检测水中粪大肠菌群是将已加入培养基的水样混匀与97孔定量盘，置于44.5±0.5℃培养24h，粪大肠菌能在该温度产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)，分解选择性培养基中的邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖(ONPG)生成黄色的邻硝基苯酚，通过定量盘大小孔显黄色数查询酶底物法的MPN表，计算出粪大肠菌群的浓度。
那么，我们在操作的过程中需要特别注意以下几点：
1、样品稀释的合理性
通过实验发现，采用酶底物法检测粪大肠菌群，水样稀释倍数越高，其测定的数值就越低，所以我们在日常检测工作中，应该根据具体的情况对水样进行逐一做小倍数的稀释，这样即可以确保检测结果的准确度，又可以提高数据的真实性。
2、样品的均匀性
我们在每次取原液时，取样的均匀度也会直接影响到后面的稀释结果，所以说在每次取样前需要充分摇匀，并尽快与培养基混合，否则会出现结果差异性很大，并且失去了该方法的稳定性。
3、温度培养的恒定性
使用酶底物法检测粪大肠菌群时，培养温度要按照要求设定，样品在培养箱中于44.5℃培养，误差控制在±0.5℃，温度偏低或偏高都会直接影响到检测结果。
4、培养时间的重要性
培养时间的长短也是会影响到检测结果的准确性，我们通过大量实验对比，发现使用酶底物法检测粪大肠菌群培养16~24h的检测结果与24h相比均有这明显的差异，而培养22~28h与24h结果差异不显著。因此，使用酶底物法检测总大肠菌群的培养时间应该在22~28h之间是可以得到准确的结果。
5、其他注意点
（1）在使用该仪器时需要配合使用51孔/97孔定量检测盘；
（2）检测样品/试剂混合液需要分配到独立的孔中；
（3）51孔定量盘可检测每100mL水样中1-200MPN值。
（4）97孔定量盘可检测每100mL水样中1-2,419MPN值。
（5）整个检测过程手工操作时间小于1分钟。
综上所述，我们在使用酶底物法检测仪器时处理遵循以上几点要求外，还要严格按照产品使用说明进行操作，不可以随意更改流程或培养温度，以免检测结果产生误差。立科酶底物法检测仪器操作方便、检测速度快、准确度高，也将在未来取代多管发酵法、滤膜法等传统检测方法。
